1. 生物化学与化学生物学
  2. 遗传学和基因组学
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5'修饰提高了DNA捐赠者的效力和效率,用于精确的基因组编辑

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引用本文金沙官网注册网址为:eLife 2021; 10: e72216 doi:10.7554 / eLife.72216

摘要

核酸酶导向的基因组编辑是研究生理学的一个强有力的工具,作为纠正引起疾病的突变的治疗方法有很大的前景。在其最精确的形式中,基因组编辑可以使用细胞同源定向修复(HDR)途径,将来自外源性提供的DNA修复模板(供体)的信息直接插入到目标基因组位置。不幸的是,特别是对于长时间插入,与修复模板DNA相关的毒性和传递考虑会限制HDR的疗效。在这里,我们探索了双链和单链dna修复模板的化学修饰。我们描述了5 '端修饰,包括以最简单的形式加入三甘醇(TEG)部分,这持续增加了三种动物模型种系中精确编辑的频率(秀丽隐杆线虫如斑马鱼、老鼠)和培养的人类细胞。

数据可用性

所有的测序数据将被保存到Dyrad,并可在https://doi.org/10.5061/dryad.f7m0cfxwr上访问

生成了以下数据集

金沙官网注册网址文章和作者信息

作者详细信息

  1. 克里希纳年代Ghanta

    美国,伍斯特,马萨诸塞大学医学院RNA治疗研究所
    相互竞争的利益
    Krishna S Ghanta,与此工作相关的专利申请的共同发明人(申请号:16/384,612)。
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000-0001-7502-3141
  2. Zexiang Chen.

    Umass医学院,伍斯特,美国
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  3. 阿米尔

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    Aamir Mir,与本工作相关的专利申请的共同发明人(申请号:16/ 384,612)。
  4. gregoriy一个dokshin

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    GREGORIY A DOKSHIN,专利申请与本作有关的专利申请(申请号:16/384,612)。
  5. Pranathi M•克里

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  6. Yeonsoo Yoon

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000-0002-4302-9933
  7. 朱迪思•格兰特

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  8. 萍徐

    美国,伍斯特,马萨诸塞大学医学院RNA治疗研究所
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  9. Xiao-Ou张

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  10. 艾哈迈德Rasit Ozturk

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  11. Masahiro胫骨

    美国马萨诸塞大学医学院分子、细胞和癌症生物学系
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000 - 0002 - 0231 - 894 - x
  12. Feston Idrizi

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000-0002-8035-3951
  13. 鹏鹏刘

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  14. 哈桑Gneid

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    Hassan Gneid,与本工作相关的专利申请的共存人员(申请号:16/384,612)。
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000-0001-9326-2023
  15. 此前Edraki

    美国,伍斯特,马萨诸塞大学医学院RNA治疗研究所
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  16. 内森D劳森

    美国马萨诸塞大学医学院分子、细胞和癌症生物学系
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000-0001-7788-9619
  17. Jaime一Rivera-Perez

    美国,伍斯特,马萨诸塞医学院
    相互竞争的利益
    没有宣布任何相互竞争的利益。
  18. Erik Sontheimer

    美国马萨诸塞大学医学院分子、细胞和癌症生物学系
    为对应
    Erik.Sontheimer@umassmed.edu
    相互竞争的利益
    Erik Sontheimer,与这项工作相关的专利申请的共同发明人(申请号:16/ 384,612)。
  19. 乔纳森·K瓦

    美国,伍斯特,马萨诸塞大学医学院RNA治疗研究所
    为对应
    Jonathan.Watts@umassmed.edu
    相互竞争的利益
    Jonathan K Watts,与本工作相关的专利申请的共同发明人(申请号:16/ 384,612)。
  20. 克雷格·C梅洛

    美国,伍斯特,马萨诸塞大学医学院RNA治疗研究所
    为对应
    Craig.Mello@umassmed.edu
    相互竞争的利益
    作者(K.S.G,A.M,G.A.D,H.G,J.K.W,E.J.S和C.C.M)的克雷格C Mello有与所描述的研究结果有关的专利申请(申请号:16/384,612)。Craig C. Mello是CRISPR治疗学的联合创始人和科学咨询委员会成员,ERIK J. Sontheimer是一个Cofound和科学咨询委员会成员Intellia Harepeics ..
    orcid图标 "此ORCID iD标识本文作者:"金沙官网注册网址0000-0001-9176-6551.

资金

霍华德休斯医学院

  • 克雷格·C梅洛

美国国立卫生研究院校外研究室(R37 GM058800-23)

  • 克雷格·C梅洛

国家转化科学推进中心(UG3 TR002668)

  • Erik Sontheimer
  • 乔纳森·K瓦

国家转化科学推进中心(UG3 TR002668)

  • Erik Sontheimer

国家心肺血液研究所(R35 HL140017)

  • 内森D劳森

美国国立卫生研究院主任办公室(R21 OD030004)

  • 内森D劳森

资助方没有参与研究设计、数据收集和解释,也没有决定是否将研究提交出版。

道德

动物实验:根据马萨诸塞大学医学院制度动物护理和使用委员会设定的议定书维持鱼类。所有鼠标实验都是根据欧姆斯研究所的动物护理和使用委员会(IACUC)进行的。

检查编辑器

  1. 杰西卡·K·泰勒,威尔康奈尔医学院,美国

出版的历史

  1. 收稿日期:2021年7月29日
  2. 录用日期:2021年9月9日
  3. 接受的手稿发表:2021年10月19日(版本1)

版权

©2021,Ghanta等人。

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